Микроскоп люминесцентный цифровой MAGUS Lum D400L

Микроскоп люминесцентный цифровой MAGUS Lum D400L — четырехканальная флуоресцентная система с монохромной камерой для лабораторных исследований

MAGUS Lum D400L — лабораторная система для флуоресцентной микроскопии с четырьмя наборами фильтров возбуждения и встроенной монохромной камерой высокой светочувствительности. Микроскоп объединяет два метода наблюдения: флуоресценцию в отраженном свете и светлое поле в проходящем свете. Планахроматическая оптика скорректирована на бесконечность, что позволяет встраивать дополнительные контрастирующие модули без потери качества изображения. Конденсор Аббе с числовой апертурой 1,25 и иммерсионный объектив 100×/1,25 обеспечивают разрешающую способность, достаточную для визуализации субклеточных структур.

Метод наблюдения и что он дает

Флуоресцентная микроскопия и четыре канала возбуждения

Флуоресценция позволяет визуализировать специфически окрашенные флуорохромами структуры: антитела с флуоресцентными метками в иммунофлуоресцентном анализе, ДНК-зонды в FISH-диагностике, живые клетки с экспрессией флуоресцентных белков. MAGUS Lum D400L оснащен четырьмя светодиодными источниками возбуждения мощностью 5 Вт с различными длинами волн: ультрафиолетовой (UV, 320–380 нм), фиолетовой (V, 380–415 нм), синей (B, 410–490 нм) и зеленой (G, 475–550 нм). Каждому источнику соответствует дихроичное зеркало и запирающий фильтр, формирующие отдельный канал флуоресценции. Переключение между каналами выполняется поворотом кольца без разборки оптического тракта. Это позволяет последовательно регистрировать несколько флуорохромов на одном препарате для многоцветного анализа.

Монохромная камера для регистрации слабого сигнала

В комплект входит монохромная камера MAGUS CLM10 с сенсором SONY Exmor CMOS размером 1/1,2 дюйма и разрешением 2,3 мегапикселя (1920×1200 пикселей). Монохромный сенсор с обратной засветкой обеспечивает светочувствительность 1016 мВ при выдержке 1/30 с и низкий уровень собственных шумов — отношение сигнал/шум составляет 0,15 мВ. Это критично при регистрации слабого флуоресцентного сигнала, когда цветной сенсор с фильтром Байера потерял бы значительную часть фотонов. Камера оснащена глобальным затвором, который считывает сигнал со всех пикселей одновременно, исключая артефакты смазывания при наблюдении подвижных объектов. Кадровая частота достигает 120 кадров в секунду при максимальном разрешении, что позволяет отслеживать динамические процессы в живых клетках.

Комбинация с проходящим светом

Светлое поле в проходящем свете используется для ориентации на препарате, морфологической оценки образца и корреляционного анализа с флуоресцентным изображением. Источник проходящего света — светодиод мощностью 3 Вт с регулируемыми апертурной и ирисовой полевой диафрагмами. Конденсор Аббе с числовой апертурой 1,25 обеспечивает согласование с объективами высокой кратности. В слот конденсора можно установить слайдер темного поля или фазового контраста, расширяя арсенал методов без замены самого конденсора.

Конструкция и технологии

Оптическая система построена на планахроматических объективах, скорректированных на бесконечность (стандарт DIN, парфокальная высота 45 мм). В комплект входят четыре объектива: PL 4×/0,10 с рабочим расстоянием 19,8 мм, PL 10×/0,25 с рабочим расстоянием 5,0 мм, микрофлюар PL FL 40×/0,85 с рабочим расстоянием 0,42 мм и иммерсионный PL 100×/1,25 с рабочим расстоянием 0,36 мм. Объективы 40× и 100× подпружинены для защиты фронтальной линзы при контакте с препаратом. Микрофлюар 40×/0,85 оптимизирован для флуоресценции и обладает высоким светопропусканием в диапазоне возбуждения. Коррекция на бесконечность означает, что параллельный пучок между объективом и тубусной линзой позволяет встраивать дополнительные оптические модули — фазовые кольца, поляризаторы, призмы дифференциального интерференционного контраста — без изменения фокусного расстояния системы.

Тринокулярная насадка типа Gemel (Зидентопф) имеет два окулярных тубуса для визуального наблюдения и отдельный вертикальный канал визуализации для установки камеры. Тубусы вращаются на 360° и наклонены под углом 30°. Межзрачковое расстояние регулируется в диапазоне 48–75 мм. В комплекте два окуляра 10×/22 с удаленным выходным зрачком 10 мм. Диапазон общего увеличения при визуальном наблюдении составляет 40–1000× (окуляр 10× умножается на кратность объективов 4×, 10×, 40×, 100×).

Предметный столик размером 180×150 мм оснащен двухкоординатным механическим приводом с диапазоном перемещения 75×50 мм. Столик не имеет выдвижной рейки, что сокращает габариты установки. В комплекте черная защитная пластина, которая устанавливается под столик для устранения паразитной засветки от проходящего света при работе в режиме флуоресценции. Фокусировка коаксиальная: грубая наводка с ходом 21 мм и шагом 39,8 мм на оборот, тонкая наводка с шагом 0,002 мм. Механизм грубой фокусировки имеет блокировку и регулировку жесткости хода. Корпус цельнолитой алюминиевый.

Камера подключается к компьютеру через интерфейс USB 3.0 с пропускной способностью 5 Гб/с. Скорость передачи данных позволяет транслировать видеопоток 120 кадров в секунду без потерь. Разрядность аналого-цифрового преобразователя переключается между 8 и 12 битами. Режим 12 бит расширяет динамический диапазон при регистрации слабых сигналов. Программное обеспечение MAGUS View поддерживает захват фото в форматах jpg, bmp, png, tif и запись видео в форматах wmv, avi, h264, h265. ПО предоставляет инструменты для управления экспозицией, балансом белого, яркостью, а также для измерения линейных и угловых размеров объектов.

Кому подойдет

MAGUS Lum D400L предназначен для научных и медицинских лабораторий, выполняющих иммунофлуоресцентный анализ, флуоресцентную гибридизацию in situ, визуализацию живых клеток с флуоресцентными репортерами. Микроскоп применяется в молекулярной биологии, клеточной биологии, иммунологии, цитогенетике, фармакологии, биотехнологиях, криминалистике, ветеринарии. Прибор рассчитан на пользователей с опытом работы в флуоресцентной микроскопии и понимающих принципы согласования источников возбуждения с эмиссионными спектрами флуорохромов. Уровень сложности настройки оптического тракта, юстировки освещения по методу Кёлера и калибровки камеры требует специальной подготовки.

Что важно знать заранее

Флуоресцентная микроскопия требует специальной подготовки образцов. Объект должен быть окрашен флуорохромом, спектр возбуждения которого соответствует одному из четырех доступных каналов. Препараты готовятся на предметных стеклах с покровным стеклом толщиной 0,17 мм, на которую рассчитаны объективы. Иммерсионный объектив 100× требует нанесения иммерсионного масла между фронтальной линзой и покровным стеклом. Флуорохромы подвержены фотообесцвечиванию при длительной экспозиции возбуждающим светом, поэтому интенсивность и продолжительность освещения должны быть минимально достаточными.

Монохромная камера регистрирует изображение в градациях серого. Для получения многоцветного изображения необходимо последовательно снять препарат в нескольких каналах флуоресценции и выполнить программное наложение с присвоением псевдоцветов каждому каналу. Рабочее расстояние объективов высокой кратности невелико: 0,42 мм у микрофлюара 40× и 0,36 мм у иммерсионного 100×. Это требует точной фокусировки и аккуратного обращения с препаратом.

Микроскоп поставляется с тремя объективами для светлого поля и одним микрофлюаром для флуоресценции. Для расширения арсенала методов доступны опциональные аксессуары: фазово-контрастное устройство, конденсоры темного поля (сухой и иммерсионный), устройство простой поляризации, дополнительные объективы и окуляры. Револьвер рассчитан на пять объективов, одно гнездо остается свободным. Конденсор имеет слот для установки слайдера темного поля или фазового контраста без замены конденсора.

Комплектация

• Цифровая камера MAGUS CLM10 — монохромная камера с сенсором 2,3 мегапикселя, глобальным затвором, кадровой частотой 120 fps, интерфейсом USB 3.0; в комплекте кабель USB, установочный диск с драйверами и ПО MAGUS View
• Штатив — цельнолитой алюминиевый корпус со встроенным источником питания, проходящим светом, коаксиальным механизмом фокусировки, двухкоординатным предметным столиком, кронштейном конденсора, револьвером на 5 объективов
• Конденсор Аббе NA 1,25 — центрируемый, регулируемый по высоте, с регулируемой апертурной диафрагмой и слотом для слайдера; крепление «ласточкин хвост»
• Люминесцентная насадка — модуль для установки фильтров возбуждения и дихроичных зеркал
• Фонарь со светодиодами — блок с четырьмя светодиодами 5 Вт для флуоресценции (UV, V, B, G) и блок питания
• Тринокулярная насадка Gemel — два окулярных тубуса с вращением на 360° и наклоном 30°, вертикальный канал визуализации для камеры
• Объективы — планахроматы PL 4×/0,10, PL 10×/0,25, микрофлюар PL FL 40×/0,85 (подпружиненный), иммерсионный PL 100×/1,25 (подпружиненный); все скорректированы на бесконечность
• Окуляры 10×/22 с удаленным зрачком 10 мм — два окуляра с наглазниками
• Переходник C-mount — для установки камеры в канал визуализации
• Четыре светофильтра — наборы фильтров возбуждения, дихроичных зеркал и запирающих фильтров для каналов UV, V, B, G
• Иммерсионное масло — для объектива 100×/1,25
• Защитный экран, пластина светового барьера, черная защитная пластина — для работы в режиме флуоресценции
• Блок питания осветителя отраженного света, сетевые шнуры, кабели, пылезащитный чехол, документация, гарантийный талон

Комплект содержит все необходимое для начала работы в режимах флуоресценции и светлого поля. Для расширения методов потребуются опциональные аксессуары.

Рекомендуемые аксессуары

Окуляры — для изменения общего увеличения доступны окуляры 12,5×, 15×, 20×, 25×, а также окуляр 10× со шкалой для визуальных измерений. Объективы — микрофлюар PL FL 10×/0,35 и планахроматы PL 20×/0,40, PL 60×/0,80 расширят диапазон кратностей. Фазово-контрастное устройство — набор объективов с фазовыми кольцами и кольцевые диафрагмы для конденсора позволят визуализировать неокрашенные живые клетки. Конденсоры темного поля — сухой (NA 0,9) или иммерсионный (NA 1,36–1,25) для наблюдения рассеянного света от границ структур. Устройство простой поляризации — поляризатор и анализатор для исследования анизотропных образцов. Калибровочный слайд — для калибровки измерительных инструментов ПО.

Итог

MAGUS Lum D400L — специализированная лабораторная система для флуоресцентной микроскопии с четырьмя каналами возбуждения, встроенной монохромной камерой высокой светочувствительности и возможностью расширения методов контрастирования. Микроскоп предназначен для научных и медицинских лабораторий, выполняющих иммунофлуоресцентный анализ, FISH-диагностику, визуализацию живых клеток с флуоресцентными маркерами. Планахроматическая оптика, скорректированная на бесконечность, высокоапертурный конденсор и глобальный затвор камеры обеспечивают качество изображения, необходимое для регистрации слабого флуоресцентного сигнала и динамических процессов.