Микромед 3 ЛЮМ 2 РТ — лабораторный люминесцентный микроскоп для флуоресцентной диагностики и исследований
Микромед 3 в варианте ЛЮМ 2 РТ — исследовательский микроскоп для работы в двух спектральных областях видимой люминесценции и по методу светлого поля в проходящем и отраженном свете. Увеличение в базовой комплектации от 40x до 1000x, с дополнительными окулярами расширяется до 20x–1600x. Оптическая схема бесконечности, планахроматические объективы, освещение Кёлера и флуоресцентный модуль с ртутной лампой 100 Вт обеспечивают разрешение до 0.27 мкм при работе с иммерсионным объективом 100x/1.25. Тринокулярная насадка с делением света 20:80 позволяет одновременно вести визуальное наблюдение и цифровую фиксацию без переключения канала.
Что можно увидеть или сделать на практике
Метод наблюдения и что он дает
Микроскоп работает в режиме эпи-люминесценции — свет возбуждения направляется на препарат через объектив, а излучение флуоресценции собирается той же оптической системой. В комплекте два люминесцентных блока: синий диапазон (возбуждение 480 нм, эмиссия 535 нм) для флуорохромов FITC и GFP, зеленый диапазон (возбуждение 545 нм, эмиссия 605 нм) для TRITC и CY3. Каждый блок состоит из дихроичного зеркала и системы светофильтров, рассчитанных на конкретный спектральный диапазон — это позволяет разделять слабый сигнал флуоресценции от яркого света возбуждения и наблюдать свечение меченых структур на темном фоне. Флуоресцентная микроскопия выявляет специфические клеточные структуры, белки, нуклеиновые кислоты и микроорганизмы, окрашенные флуорохромами, а также регистрирует собственную люминесценцию биологических объектов без дополнительного окрашивания. В режиме светлого поля через проходящий свет прибор работает как классический биологический микроскоп для исследования окрашенных гистологических срезов, мазков и культур.
Точность и повторяемость
Механический координатный столик 156×138 мм с перемещением препарата на 76×54 мм оснащен шкалами с ценой деления 1 мм и нониусами для точного позиционирования объекта. Это критично для флуоресцентных исследований, когда нужно вернуться к конкретной области препарата после смены фильтра или метода наблюдения. Центрируемый иммерсионный конденсор Аббе с числовой апертурой 0.9 (сухой режим) и 1.25 (с иммерсионным маслом) согласован с апертурой объективов и обеспечивает полное использование разрешающей способности системы. Освещение Кёлера с регулируемыми полевой и апертурной диафрагмами формирует равномерное контрастное изображение по всему полю зрения и максимально использует яркость источника света — для тринокулярной конструкции с делением потока это принципиально. Зубчато-реечная фокусировка с демпфированными направляющими имеет цену деления тонкой настройки 1 мкм, регулятор усилия хода и блокировку — это исключает люфты и обеспечивает стабильность фокуса при работе на больших увеличениях.
Область применения
Микроскоп Микромед 3 ЛЮМ 2 РТ применяется в клинической лабораторной диагностике для выявления возбудителей туберкулеза, бешенства, чумы, для диагностики онкологических заболеваний, определения белка в тканях и экспресс-выявления скрытых инфекций. В научных биологических лабораториях прибор используется для исследования локализации белков и нуклеиновых кислот в клетках, изучения живых культур с флуоресцентными маркерами, работы с иммунофлуоресцентными методами. В ветеринарии и санитарно-эпидемиологическом контроле микроскоп задействован для обнаружения микроорганизмов в биологических материалах. Контроль качества пищевых продуктов включает выявление микробной контаминации и посторонних включений. Оптическая схема бесконечности позволяет встраивать дополнительные модули без потери качества изображения, что расширяет возможности системы при модернизации.
Конструкция и технологии
В основе оптической системы — планахроматические объективы с коррекцией на бесконечность: 4x/0.10, 10x/0.25, 40x/0.70 (подпружиненный) и 100x/1.25 OIL (подпружиненный). Планахроматы исправляют кривизну поля и сферическую аберрацию — изображение остается резким по всему полю зрения, а хроматическая коррекция для двух длин волн снижает цветовые искажения. Все оптические элементы имеют многослойное просветление и антигрибковое покрытие, что критично для работы в биологических лабораториях с повышенной влажностью. Объективы установлены на пятипозиционном револьвере, повернутом от наблюдателя — такая конструкция освобождает пространство перед столиком и упрощает смену препаратов.
Флуоресцентная насадка размещена над визуальной частью микроскопа. Ртутная лампа 100 Вт в вынесенном фонаре на регулируемом держателе обеспечивает яркий свет возбуждения в двух спектральных диапазонах — синем и зеленом. Питание и поджиг лампы осуществляется от выносного блока. Поворотный диск внутри насадки переключает люминесцентные блоки: положение B (синий), положение G (зеленый) и положение 0 для работы в отраженном свете без флуоресценции. Дихроичные зеркала в блоках отражают свет возбуждения через объектив на препарат и пропускают длинноволновое излучение флуоресценции к окулярам, а запирающие фильтры отсекают остатки света возбуждения — наблюдатель видит только свечение объекта на темном фоне.
Тринокулярная насадка Зидентопфа с наклоном окулярных тубусов 30° снижает нагрузку на шейный отдел при длительной работе. Деление светового потока 20:80 направляет 80% света в визуальный канал и 20% в вертикальный тубус для камеры — это позволяет наблюдать препарат в окуляры и одновременно записывать изображение без переключения светового потока. Левый тубус имеет диоптрийную настройку ±5 диоптрий для компенсации аметропии, межзрачковое расстояние регулируется от 50 до 75 мм. Насадка поворачивается на 360° без потери фокуса. В комплекте окуляры WF 10x/22 мм с удаленным зрачком — увеличенная вынос выходного зрачка удобен при длительном наблюдении. Вертикальный канал оснащен резьбовым креплением C-mount и адаптером 0.5x под цифровые камеры с матрицей 1/2.5"–1/3".
Для проходящего света используется галогенная лампа 20 Вт / 6 В, встроенная в основание. Конденсор Аббе с двумя положениями апертуры (0.9 для сухих объективов и 1.25 для иммерсионной работы) регулируется по высоте на 21.5 мм и центрируется относительно оптической оси. Конденсор имеет слот для установки дополнительных слайдеров темного поля или фазового контраста, что расширяет методы исследования при установке соответствующих аксессуаров. Корпус микроскопа изготовлен из алюминиевого сплава литьем под давлением, на поверхность нанесено антистатическое и антигрибковое покрытие. Вес прибора 14 кг обеспечивает устойчивость конструкции и стабильность настроек.
Кому подойдет
Микромед 3 ЛЮМ 2 РТ — инструмент для специалистов, работающих с флуоресцентными методами исследования. Подходит клинико-диагностическим лабораториям для иммунофлуоресцентной диагностики инфекций, микробиологическим лабораториям для выявления возбудителей с применением флуорохромов, гистологическим лабораториям для исследования биоптатов с флуоресцентными метками. В научных лабораториях прибор используется для клеточной биологии, молекулярной диагностики, изучения локализации белков и нуклеиновых кислот методом FISH. Ветеринарные службы применяют микроскоп для диагностики зоонозных инфекций, санитарно-эпидемиологические станции — для контроля биологической безопасности. Учебные заведения медицинского и биологического профиля используют прибор для подготовки специалистов в области флуоресцентной микроскопии.
Для работы на микроскопе требуется понимание принципов флуоресценции, опыт приготовления препаратов для люминесцентных исследований, навыки работы с флуорохромами и знание техники безопасности при использовании ртутной лампы. Прибор предполагает стационарное размещение в лаборатории с возможностью затемнения помещения для флуоресцентных наблюдений.
Что важно знать заранее
Флуоресцентная микроскопия требует подготовки тонких прозрачных препаратов — мазков, срезов или культур на предметных стеклах толщиной 1.0–1.2 мм с покровным стеклом 0.17 мм. Объективы рассчитаны на эту толщину покровного стекла, отклонение снижает качество изображения. Препараты для флуоресценции окрашиваются специфическими флуорохромами или используют собственную люминесценцию биологических структур. Работа в отраженном свете предполагает наблюдение непрозрачных объектов без специальной пробоподготовки.
Иммерсионный объектив 100x/1.25 OIL требует нанесения капли иммерсионного масла между фронтальной линзой и покровным стеклом — масло устраняет потери света на границе стекло-воздух и реализует полную числовую апертуру 1.25. Для флуоресцентных работ используется нефлюоресцирующее иммерсионное масло, стандартное масло может давать собственное свечение и искажать результат. После работы масло удаляется ортоксилолом.
Ртутная лампа 100 Вт имеет ограниченный ресурс (обычно 200–300 часов) и требует периодической замены. В комплект входят две лампы. Лампа требует времени на прогрев и не должна выключаться и включаться часто — это сокращает ресурс. Работа с ртутной лампой предполагает соблюдение мер безопасности: не смотреть на источник без защиты, обеспечить вентиляцию, правильно утилизировать отработанные лампы.
Микроскоп работает от сети переменного тока 100–240 В через встроенный и внешний блоки питания. Рабочий диапазон температур +5…+40°C, относительная влажность 20–90%. Для цифровой фиксации изображения потребуется отдельная камера с креплением C-mount — в базовой комплектации камеры нет, только адаптер 0.5x.
Комплектация
- Штатив — литой алюминиевый корпус со встроенным осветителем проходящего света, механизмом фокусировки и револьверным устройством на 5 объективов
- Насадка тринокулярная ICO Infinitive — поворот 360°, наклон тубусов 30°, деление света 20:80
- Насадка флюоресцентная — фонарь с ртутной лампой 100 Вт, синий и зеленый фильтры возбуждения, блок питания, кабели
- Объективы Plan — 4x/0.10, 10x/0.25, 40x/0.70 (подпружиненный), 100x/1.25 OIL (подпружиненный), коррекция на бесконечность, рассчитаны на покровное стекло 0.17 мм
- Окуляры WF 10x/22 мм — широкоугольные с удаленным зрачком, 2 штуки, с наглазниками
- Конденсор Аббе — иммерсионный, центрируемый, N.A.=0.90/1.25, регулировка по высоте, слот для слайдеров темного поля и фазового контраста
- Столик механический координатный — размер 156×138 мм, керамическая поверхность, перемещение препарата 76×54 мм, шкалы с нониусами, съемный препаратодержатель
- Адаптер C-mount 0.5x — для установки цифровых камер с матрицей 1/2.5"–1/3"
- Набор светофильтров Ø38 мм — голубой, зеленый, желтый, матовый для проходящего света
- Лампа галогенная 20 Вт / 6 В — установлена, цоколь G4, для проходящего света
- Лампа ртутная 100 Вт — 2 штуки для флуоресцентного модуля
- Шестигранные ключи — 2 мм, 2.5 мм, 3 мм для регулировки и обслуживания
- Предохранители запасные — 5 А / 250 В (2 шт.), 3.15 А / 250 В (2 шт.)
- Чехол пылезащитный, руководство по эксплуатации
Комплект позволяет начать работу в режимах светлого поля и флуоресценции сразу после установки. Для расширения возможностей потребуется докупить иммерсионное масло (нефлюоресцирующее для флуоресцентных работ), предметные стекла 26×77 мм и покровные стекла 0.17 мм, цифровую камеру с креплением C-mount при необходимости фиксации изображений.
Рекомендуемые аксессуары
Для иммерсионной работы на увеличении 1000x необходимо нефлюоресцирующее иммерсионное масло и ортоксилол для очистки оптики после работы. Предметные стекла 26×77 мм толщиной 1.0–1.2 мм и покровные стекла 0.17 мм — расходные материалы для приготовления препаратов. Окулярная цифровая камера с креплением C-mount обеспечит фиксацию флуоресцентных изображений — адаптер 0.5x в комплекте подходит для большинства камер с матрицей 1/2.5"–1/3".
Дополнительные объективы Plan 20x/0.45 и 60x/0.80 заполнят пробелы в базовом ряду увеличений. Объективы Plan Fluor (10x/0.35, 20x/0.50, 40x/0.85, 60x/0.85, 100x/1.3 OIL) оптимизированы для флуоресцентной микроскопии и обеспечивают более высокое пропускание в ультрафиолетовой и синей областях спектра по сравнению со стандартными планахроматами.
Слайдеры фазового контраста (10x, 20x, 40x/60x/100x) и фазово-контрастные объективы добавят возможность наблюдения неокрашенных живых клеток без потери контраста. Слайдер темного поля и конденсор темного поля N.A.=0.83–0.91 позволят выявлять мелкие структуры и живые микроорганизмы за счет светорассеяния. Поляризатор и анализатор расширят методы до простой поляризации для исследования анизотропных структур.
Итог
Микромед 3 ЛЮМ 2 РТ — лабораторный люминесцентный микроскоп для флуоресцентной диагностики в двух спектральных диапазонах и классической микроскопии светлого поля. Планахроматическая оптика бесконечности, освещение Кёлера, иммерсионный конденсор и объектив 100x/1.25 OIL обеспечивают разрешение до 0.27 мкм. Тринокулярная конструкция с делением света 20:80 позволяет вести визуальное наблюдение и цифровую фиксацию одновременно. Флуоресцентный модуль с ртутной лампой 100 Вт и дихроичными блоками для FITC, GFP, TRITC, CY3 предназначен для клинической диагностики инфекций, научных исследований в биологии и микробиологии, ветеринарного и санитарно-эпидемиологического контроля.